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看完此文,別再說你不懂PCR技術了

人閱讀 發布時間:2022-04-09 21:44

  • 什么是PCR
PCR是聚合酶鏈式(Polymerase Chain Reaction)反應的簡稱,是一種將幾個或幾十個拷貝數DNA片段擴增至上百萬份拷貝的方法,這是迄今為止最為重要的技術之一。PCR技術的影響不僅僅局限于生物科學領域,幾乎人人都可以感受到PCR所帶來的改變,在親子鑒定以及犯罪調查中PCR技術便有廣泛應用。
PCR可以被認為是與發生在細胞內的DNA復制過程相似的技術,其結果都是以原來的DNA為模板產生新的互補DNA片段。細胞中DNA的復制是一個非常復雜的過程。參與復制的有多種因素。PCR是在試管中進行的DNA復制反應,基本原理與細胞內DNA復制相似,但反應體系相對較簡單。
  • PCR的基本原理
?PCR的基本原理是以需要擴增的DNA為模板,以一對分別與模板的5′和3′末端相互補的寡核苷酸片段為引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留復制的機制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成,重復這一過程,即可使目的DNA片段得到擴增。
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  • PCR的基本步驟
?PCR的基本步驟包括:① 變性:將反應系統加熱至95℃,使模板DNA全部變性變成單鏈DNA。② 退火:將溫度下降至適當溫度,使引物與模板DNA退火結合。③ 延伸:將溫度升至72℃,DNA聚合酶以DNTP底物催化DNA的合成反應。上述三個步驟稱為一個循環,這樣的循環重復25~30次,就可以得到大量的目標DNA。

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