藥物對動物腹腔巨噬細胞的影響實驗

巨噬細胞免疫調節作用的發揮是通過其抗原提呈、吞噬作用和分泌多種細胞因子而實現的。巨噬細胞發揮其免疫功能的基礎是細胞的存活，其存活狀態直接影響著其功能的發揮及應答的強弱。

對細胞存活的保護作用一般從兩個方面完成：一是促進細胞生長，二是抑制細胞凋亡。為此，本實驗針對巨噬細胞設計了一系列的實驗，結果發現，Sal能促進小鼠腹腔巨噬細胞在LPS刺激下的增殖反應，提示Sal可能是作為次級信號對LPS和IFN-γ促進巨噬細胞的信號轉導及細胞因子的分泌有協同作用，從而促進其增殖。因此提示，Sal可能對小鼠的固有免疫有增強作用。

本實驗的結果表明，Sal對CHX誘導的細胞凋亡具有抑制作用。已知CHX是一種蛋白質合成抑制劑，可通過直接與蛋白轉位酶結合，干擾轉錄過程從而抑制蛋白合成。故我們推測，Sal可能通過某些途徑阻斷了CHX與蛋白轉位酶的結合進而抑制CHX誘導的細胞凋亡。

從上述兩個實驗結果中可以得出Sal對小鼠腹腔巨噬細胞的存活具有保護作用。吞噬功能是巨噬細胞的重要功能之一，巨噬細胞通過吞噬侵入的病原體及體內衰老、畸變的細胞而提高機體的抗感染能力。

巨噬細胞對病原體等抗原性異物的識別是通過其表面模式識別受體（patternrecognitionreceptor，PRR）直接識別某些病原體或其產物所共有的高度保守的特定分子結構，或通過表面IgGFc受體（Fc??R）和補體受體（CR）識別IgG或補體結合的病原體。

巨噬細胞和病原體等抗原性異物結合后，經過吞噬或吞飲作用將病原體等攝入胞內形成吞噬體。在吞噬體內，可以通過氧依賴和氧非依賴的殺菌系統殺傷病原體。我們研究了Sal對巨噬細胞吞噬功能的影響，結果表明，Sal均能明顯提高巨噬細胞在靜息態和活化態的吞噬功能，推測Sal可能是通過某個分子結構或生物學機制，促進巨噬細胞表面的PRR和病原體或凋亡細胞表面的特定分子結構相結合，從而促進巨噬細胞的吞噬功能，增強巨噬細胞對于外來病原體的固有免疫反應。

Ryter等研究表明，ROS能夠啟動細胞的凋亡級聯反應。細胞內過量ROS的產生不但與細胞的凋亡和壞死有關，并且也與許多缺氧相關的病理學疾?。ɡ缇植咳毖獡p傷和腫瘤）有著密切的關系。

臨床和體內實驗均表明，紅景天對局部缺血性損傷具有保護性作用?，F在研究結果表明，Sal是紅景天的主要活性成分，并能對缺氧造成的胞內過量ROS的產生而誘導的細胞凋亡具有保護性作用。Sal能清除機體內不同種類的超氧陰離子自由基和羥基自由基，因此，本實驗研究了Sal對LPS和IFN-γ誘導的腹腔巨噬細胞胞內ROS產生的影響。

結果顯示，Sal能顯著降低活化巨噬細胞胞內的ROS，提示Sal的保護機制可能是直接清除腹腔巨噬細胞內的ROS，從而對過量ROS引起的腹腔巨噬細胞的凋亡起保護作用。

NO作為活化的巨噬細胞分泌的一種非特異性分子，能夠殺滅或抑制多種病原微生物生長。巨噬細胞內的NO是通過NOS途徑合成，其合成能力與抗炎作用密切相關。NO的合成可由IFN-γ所誘導，然而該誘導過程通常需要第二信號（TNF-及不同微生物成分如LPS）的存在。IFN-γ或第二信號單獨作用時，可誘導巨噬細胞合成低量的NO，但在許多情形下，沒有直接的細胞毒性作用；但IFN-γ和第二信號共同作用時，可顯著提高NO的產生，并增加巨噬細胞的細胞毒性作用。

謝樂斯等研究表明，Sal免疫小鼠的腹腔巨噬細胞能顯著提高殺傷HCa-F肝癌細胞的能力，推測Sal可能是通過iNOS介導的NO合成進而發揮殺瘤效應。

Seo等研究表明，Sal能促進IFN-γ活化的RAW264.7轉錄和表達iNOS基因，但Sal單獨作用于靜息的RAW264.7時，對iNOS基因的表達沒有影響。

我們研究了Sal對腹腔巨噬細胞分泌NO的影響。結果表明，Sal對LPS和IFN-γ誘導活化的腹腔巨噬細胞分泌NO有協同作用，提示Sal可能是作為次級信號促進腹腔巨噬細胞中iNOS基因

的表達，從而促進腹腔巨噬細胞NO的產生，這可能是機體抗病原微生物和抗腫瘤作用的機制之一。

總之，Sal能增強巨噬細胞在靜息態和活化態的吞噬功能，同時能促進NO的分泌并減少巨噬細胞胞內ROS的產生，且毒副作用小，提示其能提高整個機體固有免疫的功能，有可能成為腫瘤、感染、自身免疫病、免疫缺陷病等的輔助治療藥物，和使其成為一種很有前途的免疫調節劑。